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English| 發(fā)布日期：2023-08-16 |
宮頸癌是全球范圍內(nèi)女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一，廣泛性全子宮切除加盆腔淋巴結(jié)清掃術(shù)仍為宮頸癌的常規(guī)術(shù)式。然而此類手術(shù)可能會導致神經(jīng)損傷、淋巴水腫等并發(fā)癥的發(fā)生，同時也明顯降低了患者的生活質(zhì)量。前哨淋巴結(jié)是惡性腫瘤發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的第一站淋巴結(jié)，對惡性腫瘤區(qū)域淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況及指導淋巴結(jié)清掃具有重要意義，通過前哨淋巴結(jié)活檢可以判斷區(qū)域淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移狀態(tài)。目前，前哨淋巴結(jié)示蹤技術(shù)僅能做到對前哨淋巴結(jié)的定位，尚無法在術(shù)中直接評估淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移狀態(tài)。因此，能在術(shù)中示蹤前哨淋巴結(jié)的同時實現(xiàn)對宮頸癌前哨淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)的評估，將具有非常重大的臨床意義。
目前臨床中應用的前哨淋巴結(jié)示蹤技術(shù)包括染料法、放射性核素法和近紅外熒光成像法，但均有其局限性，沒有任何一種技術(shù)具有絕對優(yōu)勢。表面增強拉曼光譜（SERS）納米探針因其特有的指紋圖譜具有非常高的靈敏性和特異性，使其在生物醫(yī)學成像方面有明顯優(yōu)勢。SERS納米探針作為腫瘤成像技術(shù)已得到了極大關注，但其在示蹤前哨淋巴結(jié)中的研究幾乎空白。
本文分享了上海交通大學團隊使用如海便攜式拉曼光譜儀（SEED3000）在前哨淋巴結(jié)拉曼成像中的應用案例。老師通過在活體內(nèi)探索介孔硅包被的縫隙增強拉曼探針（GERTs）進入前哨淋巴結(jié)的動態(tài)過程，明確其示蹤前哨淋巴結(jié)的時間窗口；并利用便攜式拉曼光譜儀在活體動物體內(nèi)進行前哨淋巴結(jié)示蹤實驗，實現(xiàn)術(shù)中實時探測的目的。
2.1測試方法
實驗以BALB/c小鼠為實驗樣本。取小鼠4只，分別于左側(cè)后足爪墊皮下注射1 nM MS-GERTs探針生理鹽水溶液25μL，自由活動24h。1%戊巴比妥鈉腹腔注射，麻醉小鼠。麻醉成功后，小鼠仰臥位固定，分離暴露左側(cè)后足腘窩淋巴結(jié)，用如海光電的SEED3000便攜式拉曼探測儀對前哨淋巴結(jié)部位進行拉曼信號探測。檢測參數(shù)設置為：使用激光為785 nm激發(fā)波長，激光功率密度為2.4×103 W/cm2，積分時間5 s，每個淋巴結(jié)檢測5個單點（上、下、中、左、右），收集拉曼光譜。
2.2測試結(jié)果
小鼠麻醉后，用手持式拉曼探測儀對前哨淋巴結(jié)區(qū)域進行定點檢測，每個淋巴結(jié)檢測5個部位（圖1）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)任何一個部位都能探測到非常明顯的探針拉曼信號，表明使用如海便攜式拉曼光譜儀SEED3000可以對前哨淋巴結(jié)進行實時定位。
圖1 手持式拉曼探測儀示蹤前哨淋巴結(jié)。（a）活體內(nèi)拉曼探測，圖中比例尺為1 cm；（b）前哨淋巴結(jié)檢測的5個部位（7上，8右，9下，10左，11中），圖中比例尺為400 μm；（c）b中5個部位7-11相對應的拉曼光譜
[1]包州州. 縫隙增強拉曼探針在宮頸癌轉(zhuǎn)移前哨淋巴結(jié)中的成像研究[D]. 上海交通大學, 2020.
SEED3000便攜式拉曼光譜儀
SEED3000便攜式拉曼光譜儀是一款高性價比的785 nm小型拉曼光譜儀；結(jié)構(gòu)簡單，檢測快速，預留USB和串口通信，方便多功能系統(tǒng)集成，可滿足實驗室、野外以及工業(yè)現(xiàn)場等多種實驗場景。已被廣泛應用于食品安全、國防安全、珠寶鑒定、醫(yī)藥等需對原材料快速篩選、現(xiàn)場快速檢測及物質(zhì)分析鑒定等行業(yè)。
◆ 高度集成，應用靈活，輕巧便捷，方便攜帶；
◆ 可適配光譜范圍在200 cm-1～3200 cm-1;
◆ 高穩(wěn)定性，光譜響應穩(wěn)定性<2% @ 2hrs;
◆ 高分辨率，分辨率最佳可達4 cm-1。
